Le gène F2, qui code pour la thrombine, est situé dans la région chromosomique 11p11.2 de l′homme.

La thrombine issue de plasma humain a été utilisée :

• Sous forme dissoute dans du CaC_l2 et ajoutée à une solution de cellules contenant du fibrinogène modifié par du poly(éthylène glycol) pour la production de fibrine.
• Pour polymériser de la fibrine sur des plaques à puits.
• Comme protéinase agoniste endogène pour les récepteurs activés par les protéinases : PAR1, PAR3 et PAR4 afin de stimuler des cellules.

La thrombine est une protéase à sérine endolytique qui stimule la production de cellules endothéliales et mésenchymateuses, de plaquettes et de leucocytes induits par les dommages vasculaires. Cette action est médiée par le récepteur couplé aux protéines G. Elle catalyse le clivage du fibrinogène au niveau des liaisons Arg−Gly pour former de la fibrine et libérer des fibrinopeptides A et B. La forme prédominante in vivo de la thrombine est le zymogène prothrombine (facteur II), produit dans le foie. La prothrombine est un facteur d′activation de la coagulation, dont les taux élevés indiquent un cancer. La thrombine peut servir à cliver les protéines de fusion. Le clivage des protéines de fusion peut être réalisé avec un rapport thrombine/protéine de fusion de 1/500.

Sérine protéase qui clive sélectivement les liaisons Arg-Gly du fibrinogène pour former la fibrine et les fibrinopeptides A et B.

L′activité est exprimée en unités NIH et obtenue par comparaison directe à un étalon de référence de la thrombine du NIH.

Produit lyophilisé à partir d′une solution saline tamponnée au citrate, à pH 6,5.

La procédure d′analyse selon le NIH, basée sur une modification de la méthode de Biggs, utilise 0,2 ml de plasma dilué (1:1 dans une solution saline) comme substrat et 0,1 ml d′échantillon de thrombine (stabilisé dans une solution tamponnée contenant 1 % d′albumine). Seuls les temps de coagulation dans la plage de 15 à 25 secondes sont utilisés pour déterminer les concentrations en thrombine.

Pour en savoir plus sur la thrombine, rendez-vous sur www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

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