La TMB est un substrat de la peroxydase de raifort. Elle forme un produit final de couleur bleue soluble qui peut être mesuré à 370 nm ou 655 nm. La réaction de la TMB peut être arrêtée par l'ajout d'H₂SO₄ 0,5 M, le produit jaune résultant étant mesurable à 450 nm. Ce substrat est recommandé pour les protocoles ELISA (micropuits) ; il n'est pas recommandé pour les techniques à membrane.
La 3,3′,5,5′-tétraméthylbenzidine a été utilisée dans une étude visant à démontrer que mesurer le spectre d'absorption du substrat à distance du pic d'absorption permet d'élargir considérablement la plage de mesure de tout dosage immunoenzymométrique sans compromettre les caractéristiques du dosage. La 3,3′,5,5′-tétraméthylbenzidine a également été utilisée dans une étude visant à comprendre la formation des superstructures de CuS concaves à activité peroxydasique.

Ce substrat est très sensible à la lumière. Il doit donc être conservé à l'abri du soleil ou de toute autre source de rayonnement UV.

Prêt à l'emploi.