聚合酶链式反应(PCR)应用

逆转录酶 PCR (RT-PCR)

RT-PCR，或称逆转录PCR，由标准PCR技术衍变而来，可对从极少样品中提取出的特定信使RNA进行扩增。免去了传统克隆技术中冗长的信使RNA提纯过程。在逆转录PCR中，除使用标准PCR反应物外，还可使用逆转录酶和RNA样品。其中逆转录酶在反应被加热到37摄氏度时可从RNA样品中合成一条互补配对的cDNA拷贝。然后，这条cDNA链与引物退火配对合成第一条链。之后按标准PCR的流程生成双链DNA。逆转录PCR经常与实时定量PCR（qPCR）结合，广泛应用于细胞及组织转录水平的定量分析。

热启动PCR

热启动PCR技术用于在热激活执行前抑制反应中热启动Taq聚合酶活性或阻止经修饰脱氧核糖核酸的聚合。控制热启动聚合酶的活性的方法多样，包括化学修饰、抗体介导及适配体介导。 

利用终点PCR对较长目标准确扩增

终点PCR通常在反应完成后用于探测目标是否存在及其相对丰度。由于附加了具备“校正”功能的元素，标准PCR能合成序列的长度最高为5000个碱基对。而兼具长度及准确度 （LA）的PCR结合第二种具有3’ 5’ 外切酶功能的热稳定聚合酶可修复末端核苷酸错参，所以不仅能够扩增长达40000个碱基对的DNA目标链，还极大地提高了其准确性。