WTA1

TransPlex^® Whole Transcriptome Amplification Kit

DNA polymerase separate.

• Synonym(e): TransPlex^® Gesamt-Transkriptom Amplifikations-Kit, Transkriptom-Amplifikationskit
• UNSPSC-Code: 41121800
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 200
• Methode(n): whole genome amplification: suitable
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

TransPlex^® ist eine Methode zur Amplifikation des Gesamttranskriptoms (GTA). Sie ermöglicht die repräsentative Amplifikation von Nanogramm-Mengen der Gesamt-RNA in weniger als 4 Stunden ohne 3′-Verzerrung. Mikrogramm-Mengen von Amplifikationsprodukten, die aus Gewebe, kultivierten Zellen, formalinfixierten Proben oder Serum gewonnen wurden, eignen sich für Downstream-Anwendungen wie qPCR oder Microarray-Analysen.

Anwendung

Das TransPlex^® Gesamttranskriptom-Amplifikations-Kit dient zur Synthese von Doppelstrang-cDNA. Es wird außerdem für die Amplifikation von cDNA eingesetzt.

Geeignet zur Verwendung mit nachgelagerten Anwendungen, darunter:

• qPCR
• Microarray-Analyse
• Klonierung

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Amplifikation der Gesamt-RNA in weniger als 4 Stunden mit unter 30 Minuten tatsächlicher Bearbeitungszeit
• Nur 5 ng Ausgangsmaterial sind erforderlich, um eine hochgradig repräsentative Bibliothek der Gesamt-RNA zu erstellen
• Mikrogramm-Mengen von Amplifikationsprodukten, die aus intakter RNA aus Gewebe, Kulturzellen, Serum oder zersetzter RNA aus formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Proben gewonnen wurden

Prinzip

Das WTA-Verfahren umfasst zwei Schritte. Im ersten Schritt wird die Proben-RNA mit nicht-selbstkomplementären Primern, die ein quasi-randomisiertes 3′-Ende und ein universelles 5′-Ende besitzen, revers transkribiert. Im Verlauf der Polymerisation dienen verschobene Einzelstränge als neue Templates für das Primer-Annealing und die Extension. Die resultierende OmniPlex cDNA-Bibliothek besteht aus zufällig generierten, überlappenden Fragmenten mit einer Länge von 100–1.000 Basen, die flankiert sind von der universellen Endsequenz. Ihre Amplifikation mittels PCR mit dem Universalprimer ergibt dann das WTA-Produkt.

Rechtliche Hinweise

TransPlex is a registered trademark of Rubicon Genomics, Inc.

Kit-Komponenten auch einzeln erhältlich

• W4502 Water, Nuclease-Free Water, for Molecular Biology
• D7295 Deoxynucleotide Mix, 10 mM, Molecular Biology Reagent

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS07
• Signalwort: Warning
• H-Sätze: H319
• P-Sätze: P264 - P280 - P305 + P351 + P338 - P337 + P313
• Gefahreneinstufungen: Eye Irrit. 2
• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable