Kiểm nghiệm tính vô trùng

Các thủ tục kiểm tra vô trùng được áp dụng cho các sản phẩm trong nhiều ngành công nghiệp, bao gồm các nhà sản xuất thực phẩm và đồ uống, nhưng các ngành công nghiệp chính là các lĩnh vực dược phẩm và y tế nơi thử nghiệm vô trùng của các sản phẩm vẫn là một nhiệm vụ quan trọng và thường xuyên cho các nhà vi sinh học.

• Pharmaceutical Sterility Testing Methods
• Phương pháp kiểm tra tính vô trùng cho các thiết bị y tế
• Sterility Testing Workflow

Pharmaceutical Sterility Testing Methods

Các phương pháp so sánh để kiểm tra tính vô trùng của các sản phẩm dược phẩm đòi hỏi mẫu phải được nuôi cấy trong hai phương tiện riêng biệt. Hai loại môi trường nuôi cấy khác nhau được sử dụng trong thử nghiệm vô trùng để thúc đẩy sự phát triển của vi khuẩn kỵ khí còn sót lại, cũng như aerobes và nấm. Môi trường thioglycolate chất lỏng (FTM) thường được sử dụng để nuôi cấy vi khuẩn kỵ khí và một số vi khuẩn hiếu khí, trong khi môi trường phân hủy đậu nành (SCDM) thường được sử dụng để nuôi cấy nấm và vi khuẩn hiếu khí. Các mẫu được ủ trong 14 ngày ở 32,5 °C và 22,5 °C tương ứng, trước khi kiểm tra. Bất kỳ độ đục nào trong môi trường nuôi cấy có thể chỉ ra sự tăng trưởng và phải được điều tra. Có hai phương pháp thử nghiệm vô trùng được khuyến nghị cho dược phẩm: Lọc màng và tiêm trực tiếp.

Membrane Filtration Sterility Testing

Kiểm tra tính vô trùng lọc màng là phương pháp điều chỉnh được lựa chọn cho các sản phẩm dược phẩm có thể lọc được, như được trích dẫn trong USP <71>, Dược điển EU < 2,6.1> và JP Pharmacopoeia <4,06>. Các mẫu được truyền qua bộ lọc màng 0,45 µm trong bình lọc và môi trường nuôi cấy được thêm vào để ủ bệnh. Phương pháp thử nghiệm vô trùng này có thể cung cấp độ nhạy tăng so với các phương pháp khác như toàn bộ mẫu, hoặc mẫu hỗn hợp được truyền qua một bộ lọc duy nhất. Lọc cũng cung cấp cơ hội rửa sạch các thành phần trong mẫu có thể gây ra đục hoặc ức chế sự phát triển, chẳng hạn như kháng sinh hoặc chất bảo quản.

Direct Inoculation Sterility Testing

Trong tiêm chủng trực tiếp, một thể tích mẫu nhỏ được loại bỏ vô trùng khỏi đơn vị mẫu và tiêm trực tiếp vào một thể tích thích hợp của môi trường tăng trưởng trước khi ủ. Mặc dù đơn giản, phương pháp kiểm thử này có thể có một số hạn chế đáng kể. Chỉ có thể tiêm một lượng nhỏ sản phẩm vào môi trường nuôi cấy, hạn chế độ nhạy thử nghiệm. Nếu mẫu có vẻ đục hoặc đục sau khi tiêm, có thể khó phát hiện độ đục từ sự tăng trưởng vi sinh vật vào cuối thời kỳ ủ bệnh. Ngoài ra, nếu sản phẩm có đặc tính kháng khuẩn, mẫu phải được trung hòa để sự phát triển của vi sinh vật không bị ức chế.

Phương pháp kiểm tra tính vô trùng cho các thiết bị y tế

Kiểm tra vô trùng chuyển trực tiếp được khuyến nghị để kiểm tra vô trùng thiết bị y tế. Thiết bị được thử nghiệm tiếp xúc trực tiếp với môi trường thử nghiệm trong suốt thời gian ủ bệnh, trong đó bất kỳ vi sinh vật nào trong hoặc trên thiết bị sẽ phát triển và tăng sinh. Hơn nữa, xét nghiệm vô trùng phun sản phẩm được ưu tiên cho các sản phẩm có ống rỗng, chẳng hạn như cụm truyền máu và truyền dịch, nơi con đường chất lỏng được dán nhãn là vô trùng. Lumen sản phẩm được rửa bằng chất lỏng rửa sạch, lute được lọc màng và được đặt trong môi trường thích hợp để ủ.

Sterility Testing Workflow

1. Chuẩn bị thử nghiệm—Đặt ống thiết bị lọc màng vào bơm

2. Làm ướt trước bộ lọc—Chuẩn bị thiết bị lọc màng để tối ưu hóa quá trình lọc và giảm thiểu sự liên kết của sản phẩm với bộ lọc.

3. Lọc Mẫu—Lọc một lượng sản phẩm bằng nhau vào cả hai hộp. Vi sinh vật được giữ lại bởi bộ lọc kích thước lỗ rỗng 0,45 µm.

4. Rửa sạch—Tất cả các hợp chất ức chế đều được rửa sạch bằng (các) dung dịch rửa phù hợp.

5. Môi trường nuôi cấy—Thiết bị lọc màng được lấp đầy bằng môi trường nuôi cấy vô trùng TSB và FTM.

6. Thời gian ủ bệnh - 14 ngày.

7. Kết quả Kiểm tra Cuối cùng—Kiểm tra Độ đục trực quan /không có độ đục.