C2399

Colagenase

Name: Colagenase
Brand: SIGMA

0.2 μm filtered, high purity, purified by chromatography, Type VII-S, ≥4 FALGPA units/mg solid, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

Sinônimo(s):

Clostridiopeptidase A

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About This Item

CAS Number:

9001-12-1

Número CE:

3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)

Número CE:

232-582-9

Número MDL:

MFCD00130830

Código UNSPSC:

12352204

NACRES:

NA.54

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Nível de qualidade

200

esterilidade

0.2 μm filtered

Formulário

lyophilized powder

atividade específica

≥4 FALGPA units/mg solid
≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

purificado por

chromatography

solubilidade

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

temperatura de armazenamento

−20°C

Aplicação

Collagenase from Clostridium histolyticum has been used:

to induce intracerebral hemorrhage (ICH) in mice
to digest collagen 3D gels for immunofluorescence
to cause focal blood extravasation and hemorrhage in mouse

Collagenase has been used in the preparation of arterial tissue for the study of Advanced Glycosylation End Products (AGE). The enzyme has also been used along with other proteases for the disaggregation of human tumor, mouse kidney, human brain, lung epithelium and many other tissues. It is also effective in liver and kidney perfusion studies, digestion of pancreas, and isolation of nonparenchymal hepatocytes.

Ações bioquímicas/fisiológicas

A colagenase é ativada por quatro gramas de átomos de cálcio por mol de enzima. Ela é inibida por ácido etileno glicol-bis(beta-aminoetil éter)-N, N, N′,N′-tetracético, beta-mercaptoetanol, glutationa, ácido tioglicólico e 8-hidroxiquinolina.

Clostridium histolyticum contains two classes of collagenases. Clostridial collagenases are more effective than mammalian collagenases. It cleaves at multiple cleavage sites within the collagen triple helix. Clostridial collagenases are involved in bacterial invasion in gas gangrene.

Effective release of cells from tissue requires the action of both collagenase enzymes and the neutral protease. Collagenase is activated by four gram atom calcium (Ca²⁺) per mole enzyme. The culture filtrate is thought to contain at least 7 different proteases ranging in molecular weight from 68-130 kDa (pH optimum: 6.3-8.8). The enzyme recognizes the sequence -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-, where X is most often a neutral amino acid.

Definição da unidade

Uma unidade de digestão de colágeno (CDU) libera peptídeos de colágeno do tendão de Aquiles bovino que equivalem em cor de ninidrina a 1,0 μmol de leucina em 5 horas em pH 7,4 a 37 °C na presença de íons de cálcio. Uma unidade de hidrólise de FALGPA hidrolisa 1,0 μmol de furilacriloil-Leu-Gli-Pro-Ala por min a 25 °C. Uma unidade de protease neutra hidrolisa caseína para produzir cor equivalente a 1,0 μmol de tirosina por 5 h em pH 7,5 a 37 °C. Uma unidade de clostripaína hidrolisa 1,0 μmol de BAEE por min em pH 7,6 a 25 °C na presença de DTT.

Nota de preparo

Prepared from Type VII (C0773). A stock solution may be prepared by dissolving 0.05-0.1 mg of collagenase in one mL of 50 mM TES buffer containing 0.36 mM calcium chloride (TESCA), pH 7.4 at 37 °C.

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