T9935

Tripsina

essentially salt-free, lyophilized powder, ≥9,000 BAEE units/mg protein, BioReagent, suitable for cell culture

• Sinônimo(s): Serine Protease 1
• CAS Number: 9002-07-7
• Número CE: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• Número CE: 232-650-8
• Número MDL: MFCD00082094
• Código UNSPSC: 12352204
• NACRES: NA.54

Propriedades

• linha de produto: BioReagent
• Nível de qualidade: 200
• Formulário: essentially salt-free, lyophilized powder
• atividade específica: ≥9,000 BAEE units/mg protein
• peso molecular: 23.8 kDa
• composição: protein, ≥80%
• técnica(s): cell culture | mammalian: suitable
• solubilidade: hydrochloric acid: soluble 1 mM
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Aplicação

Para digestão de peptídeos por tripsina, use uma proporção de cerca de 1:100 a 1:20 de tripsina:peptídeo. O uso típico deste produto é na remoção de células aderentes de uma superfície de cultura. A concentração de tripsina necessária para desalojar as células do substrato depende principalmente do tipo de célula e da idade da cultura. As tripsinas também foram usadas para ressuspender células durante a cultura celular, para pesquisa em proteômica para digerir proteínas e em diversas digestões em gel. Outras aplicações incluem a avaliação da cristalização por técnicas baseadas em membranas e em um estudo para determinar que as taxas de dobramento de proteínas e a produção de proteínas podem ser limitadas pela presença de armadilhas cinéticas.

Trypsin from bovine pancreas has been used for enzymatic digestion of nucleus pulposus (NP) cells during human NP cells isolation. It has also been used as a immunopanning reagent for purification of cells.

Ações bioquímicas/fisiológicas

A tripsina cliva peptídeos no lado C-terminal dos resíduos de lisina e arginina. A taxa de hidrólise dessa reação é diminuída se houver um resíduo ácido em qualquer lado do sítio de clivagem, e a hidrólise é interrompida se houver um resíduo de prolina no lado carboxila do sítio de clivagem. O pH ótimo para a atividade de tripsina é 7-9. A tripsina também pode clivar ligações de éster e amida de derivados sintéticos de aminoácidos. O EDTA é adicionado a soluções de tripsina como um quelante que neutraliza íons de cálcio e magnésio que obscurecem as ligações peptídicas nas quais a tripsina age. A remoção desses íons aumenta a atividade enzimática.

Os inibidores de protease de serina, inclusive o DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF e a aprotinina, dentre outros, inibem a tripsina.

Componentes

Trypsin consists of a single chain polypeptide of 223 amino acid residues, produced by the removal of the N-terminal hexapeptide from trypsinogen which is cleaved at the Lys - lle peptide bond. The sequence of amino acids is cross-linked by 6 disulfide bridges. This is the native form of trypsin, beta-trypsin. BETA-trypsin can be autolyzed, cleaving at the Lys - Ser residue, to produce alpha-trypsin. Trypsin is a member of the serine protease family.

Atenção

Solutions in 1 mM HCl are stable for 1 year in aliquots and stored at -20°C. The presence of Ca²⁺ will also diminish the self-autolysis of trypsin and maintain its stability in solution. Trypsin will also retain most of its activity in 2.0 M urea, 2.0 M guanidine HCl, or 0.1% (w/v) SDS.

Definição da unidade

Uma unidade de BAEE produz A₂₅₃ de 0,001 por minuto em pH 7,6 a 25 °C usando BAEE como substrato.

Nota de preparo

This product is from pancreas sourced from New Zealand. It is soluble in 1 mM HCl at 1 mg/mL.
For applications that involve EDTA, solubilizing trypsin should be done with a buffered salt solution containing no Ca²⁺ or Mg²⁺.

Informações de segurança

• Pictogramas: GHS08,GHS07
• Palavra indicadora: Danger
• Frases de perigo: H315,H319,H334,H335
• Declarações de precaução: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Classificações de perigo: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órgãos-alvo: Respiratory system
• Código de classe de armazenamento: 11 - Combustible Solids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 1
• Equipamento de proteção individual: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves