Production de vaccins à ADN plasmidique

Accélérer le passage à la phase clinique tout en augmentant la productivité upstream

L'ADNp présente plusieurs difficultés qui peuvent être surmontées grâce à des technologies de pointe à usage unique pour la récolte des cellules et la clarification. La centrifugation ou la microfiltration tangentielle (MF-TFF) permet de retirer le bouillon de fermentation épuisé, tandis que des filtres en profondeur ont montré d'excellentes performances dans un large éventail de conditions pour la clarification.

Atteindre les objectifs de rendement et d'efficacité avec une élimination robuste des impuretés

L'échange d'anions (AEX) a fait ses preuves en tant que méthode de clairance robuste des protéines, de l'ARN, de l'ADNg et des endotoxines. Les isoformes des plasmides sont toutefois très difficiles à séparer par échange d'ions. Dans ce cas, il est possible d'opter pour la chromatographie hydrophobe (HIC) qui est bien placée après l'AEX en raison du pool d'éluat à forte teneur en sels.

Maximiser la quantité de produit récupéré en aval

Purifier de l'ADNp est complexe et nécessite d'associer la filtration tangentielle (TFF) à la chromatographie. La TFF peut être positionnée entre l'étape de clarification et l'étape de chromatographie, où les impuretés résiduelles peuvent être retirées par diafiltration et où l'ADNp peut être concentré par chromatographie. La purification chromatographique peut se fait aussi bien sur des résines que des membranes. Les résines permettent d'avoir des installations flexibles et une bonne sélectivité, tandis que les membranes procurent une grande capacité d'adsorption et de hauts débits.

Garantir la sécurité des patients

Une fois purifié et formulé, l'ADNp doit être stérilisé par filtration pour garantir la sécurité des patients. Même si cette étape peut sembler relativement simple, filtrer l'ADNp peut s'avérer difficile en raison de la grande taille des plasmides, de la viscosité importante de la solution et de la rétention bactérienne pour les formulations contenant des adjuvants. Un grand nombre de paramètres opérationnels doivent être pris en compte pour optimiser la filtration de qualité "stérilisation", notamment la concentration en sels, la taille du plasmide, sa pureté et sa concentration.