11684817910
Roche
Kit de détection in situ de mort cellulaire avec POD
sufficient for ≤50 tests
Synonyme(s) :
mort cellulaire
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About This Item
Code UNSPSC :
12352200
Produits recommandés
Utilisation
sufficient for ≤50 tests
Niveau de qualité
Fabricant/nom de marque
Roche
Technique(s)
immunohistochemistry: suitable
Température de stockage
−20°C
Catégories apparentées
Description générale
Kit de détection et de quantification de la mort cellulaire apoptotique à l′échelle de la cellule individuelle par microscopie optique classique en immunohistocytochimie.
Application
Le Kit de détection in situ de mort cellulaire avec POD est une technique non radioactive, précise, rapide et simple de détection et de quantification de la mort cellulaire apoptotique à l′échelle de la cellule individuelle dans les cellules et les tissus. Le Kit de détection in situ de mort cellulaire peut donc être utilisé dans de nombreux systèmes d′analyse différents.
- Il peut servir par exemple : Pour la détection individuelle des cellules apoptotiques dans les sections de tissus fixés au formol et inclus dans la paraffine congelés, en recherche fondamentale et en analyse pathologique de routine.
- Pour la détermination de la sensibilité des cellules malignes à l′apoptose induite par des composés pharmaceutiques, en oncologie clinique et en recherche cancérologique.
- Pour le typage des cellules subissant une mort cellulaire dans les populations hétérogènes, à l′aide de procédures de double coloration.
Caractéristiques et avantages
Sensible : L′intensité maximale du marquage (coloration) des cellules apoptotiques est supérieure à celle obtenue avec la méthode par translation de coupure.
Rapide : L′utilisation de dUTP-fluorescéine permet d′analyser les échantillons directement après la réaction TUNEL, mais avant ajout du système de détection secondaire.
Pratique : La procédure de marquage direct au dUTP-fluorescéine permet de vérifier l′efficacité de la réaction TUNEL durant la procédure d′analyse.
Précis : Identification de l′apoptose au niveau moléculaire (cassures des brins d′ADN) et identification des cellules aux toutes premières étapes de l′apoptose.
Flexible : L′absence de substrat dans le kit donne la possibilité de choisir sa procédure de coloration.
Rapide : L′utilisation de dUTP-fluorescéine permet d′analyser les échantillons directement après la réaction TUNEL, mais avant ajout du système de détection secondaire.
Pratique : La procédure de marquage direct au dUTP-fluorescéine permet de vérifier l′efficacité de la réaction TUNEL durant la procédure d′analyse.
Précis : Identification de l′apoptose au niveau moléculaire (cassures des brins d′ADN) et identification des cellules aux toutes premières étapes de l′apoptose.
Flexible : L′absence de substrat dans le kit donne la possibilité de choisir sa procédure de coloration.
Conditionnement
1 kit constitué de 3 éléments.
Principe
Le Kit de détection in situ de mort cellulaire avec POD repose sur la détection des cassures de l′ADN simple et double brin qui se produisent durant les premières étapes de l′apoptose.
Les cellules apoptotiques sont fixées et perméabilisées. Elles sont ensuite incubées avec le mélange réactionnel TUNEL qui contient de la TdT et du dUTP-fluorescéine. Durant cette période d′incubation, la TdT catalyse l′addition de dUTP-fluorescéine sur les groupes 3′-OH libres de l′ADN simple et double brin. Après lavage, le marqueur incorporé au niveau des sites endommagés de l′ADN est marqué par un anticorps anti-fluorescéine conjugué à la peroxydase servant d′enzyme rapporteur. Après un lavage permettant d′éliminer le conjugué d′enzyme non lié, la POD retenue dans le complexe immun est visualisée par une réaction sur un substrat.
Les cellules apoptotiques sont fixées et perméabilisées. Elles sont ensuite incubées avec le mélange réactionnel TUNEL qui contient de la TdT et du dUTP-fluorescéine. Durant cette période d′incubation, la TdT catalyse l′addition de dUTP-fluorescéine sur les groupes 3′-OH libres de l′ADN simple et double brin. Après lavage, le marqueur incorporé au niveau des sites endommagés de l′ADN est marqué par un anticorps anti-fluorescéine conjugué à la peroxydase servant d′enzyme rapporteur. Après un lavage permettant d′éliminer le conjugué d′enzyme non lié, la POD retenue dans le complexe immun est visualisée par une réaction sur un substrat.
Notes préparatoires
Conditions de stockage (solution de travail) : Mélange réactionnel TUNEL
Le mélange réactionnel TUNEL doit être préparé juste avant utilisation et ne doit pas être stocké. Conserver le mélange réactionnel TUNEL sur de la glace en attendant de l′utiliser.
Peroxydase de conversion
Une fois décongelée, la solution de peroxydase de conversion doit être conservée entre 2 et 8 °C pour une durée maximale de 6 mois.
Remarque : Ne pas congeler.
Échantillon : Préparations obtenues sur un appareil Cytospin et préparations de frottis cellulaires, cellules adhérentes cultivées sur des lames, et sections de tissus inclus dans la paraffine et congelés.
Le mélange réactionnel TUNEL doit être préparé juste avant utilisation et ne doit pas être stocké. Conserver le mélange réactionnel TUNEL sur de la glace en attendant de l′utiliser.
Peroxydase de conversion
Une fois décongelée, la solution de peroxydase de conversion doit être conservée entre 2 et 8 °C pour une durée maximale de 6 mois.
Remarque : Ne pas congeler.
Échantillon : Préparations obtenues sur un appareil Cytospin et préparations de frottis cellulaires, cellules adhérentes cultivées sur des lames, et sections de tissus inclus dans la paraffine et congelés.
Composants de kit seuls
Réf. du produit
Description
- Enzyme Solution (TdT)
- Label Solution (fluorescein-dUTP)
- Converter Peroxidase (anti-fluorescein antibody-peroxidase) ready-to-use
Mention d'avertissement
Danger
Mentions de danger
Conseils de prudence
Classification des risques
Aquatic Chronic 2 - Carc. 1B Inhalation - Skin Sens. 1
Code de la classe de stockage
6.1D - Non-combustible acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 3
Point d'éclair (°F)
does not flash
Point d'éclair (°C)
does not flash
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