COLLDISP-RO

Collagénase/dispase^®

lyophilized, non-sterile, optimum pH 7.0-8.0

• Synonyme(s) : collagénase
• Code UNSPSC : 12352204

Propriétés

• Source biologique: enzyme from Bacillus polymyxa ( Dispase ); enzyme from bacterial ( Collagenase from Vibrio alginolyticus)
• Niveau de qualité: 100
• Stérilité: non-sterile
• Forme: lyophilized
• collagenase activity: >0.1 U/mg lyophilizate, 25 °C (4-phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg as substrate)
• Activité spécifique: >0.8 U/mg lyophilizate, pH 7.5, 37 °C (casein as substrate, Dispase)
• Conditionnement: pkg of 100 mg (10269638001); pkg of 500 mg (11097113001)
• Fabricant/nom de marque: Roche
• Concentration: 1 mg/mL (Collagenase: 0.1U/mL, Dispase: 0.8U/mL)
• Technique(s): tissue processing: suitable
• Couleur: light yellow to brown
• pH optimal: 7.0-8.0
• Solubilité: water: soluble
• Numéro d'accès UniProt: P43154
• Application(s): life science and biopharma; sample preparation
• Activité étrangère: proteolytic activities <0.1 U/mg (hemoglobin as the substrate)
• Température de stockage: 2-8°C

Description

Description générale

La Dispase est une protéase neutre, d′action rapide mais douce, qui sépare l′épiderme intact du derme. Elle sépare également du substrat de culture les cellules épithéliales intactes. Elle clive la zone de la membrane basale et laisse les cellules épithéliales intactes. La collagénase est une protéase qui clive la protéine en triple hélice appelée collagène. Il existe trois types de collagénases tissulaires, qui appartiennent à la famille des métalloprotéinases matricielles (MPM). La collagénase issue de Clostridium histolyticum est particulièrement réactive, car elle digère le collagène par ses deux extrémités à des températures aussi basses que 4-10 °C.

Spécificité

La collagénase dégrade le collagène natif. La Dispase^® est une protéase non spécifique.

Application

La collagénase/Dispase^® est utilisée dans la préparation de cellules provenant d′un vaste éventail de tissus et organes.

Composants

N° EC 3.4.24.3 et 3.4.24.3

Définition de l'unité

Une unité correspond à l'activité enzymatique qui libère, en 1 minute et dans les conditions du test, des peptides et des acides aminés positifs au réactif de Folin correspondant à 1 μmol de tyrosine.

Notes préparatoires

Activateur : Ca²⁺

Concentration de travail : Environ 1 mg/ml (collagénase : 0,1 U/ml, Dispase : 0,8 U/ml)

Activité enzymatique :
Collagénase : 0,1 U/mg de lyophilisat (selon Wünsch) (à +25 °C, substrat : 4-phényl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg)
Dispase^® : 0,8 U/mg de lyophilisat (selon Wünsch) (à +37 °C, substrat : caséine, pH 7,5)
Contamination par activités protéolytiques : <0,1 U/mg de lyophilisat (substrat : hémoglobine)

Solution de travail : Préparation de la solution de travail Dissoudre l′enzyme dans de l′eau à une concentration finale de 100 mg/ml. Diluer avec PBS (sans Ca²⁺/Mg²⁺) à une concentration finale de 1 mg/ml et filtrer à travers une membrane de 0,2 μm.
Concentration enzymatique de la solution stérile : collagénase, 0,1 U/ml dans PBS, Dispase^®, 0,8 U/ml de PBS.

Inhibiteurs :
Inhibiteurs de collagénases : EDTA, EGTA
La collagénase/Dispase n′est pas inhibée par le sérum.

Conditions de stockage (solution de travail) : -15 à -25°C
La solution reconstituée est stable entre -15 et -25°C.
Remarque : stockez en parts aliquotes de taille adaptée et évitez les congélations et décongélations répétées.

Reconstitution

Reconstitution dans l′eau à 100 mg/ml. Dilution ultérieure avec une solution tampon phosphate (PBS) sans Ca²⁺/Mg²⁺.

Stockage et stabilité

À conserver au sec.

Autres remarques

Collagénase issue de Vibrio alginolyticus, Dispase^® issue de Bacillus polymyxa

Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Informations légales

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS07,GHS08
• Mention d'avertissement: Danger
• Mentions de danger: H315 - H319 - H334 - H335
• Conseils de prudence: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Classification des risques: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Organes cibles: Respiratory system
• Code de la classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Point d'éclair (°F): does not flash
• Point d'éclair (°C): does not flash