H4272

Hyaluronidase from bovine testes

Type IV-S, powder, suitable for mouse embryo cell culture, 750-3000 units/mg solid

• Synonyme(s) : Hyaluronate 4-glycanohydrolase, Hyaluronoglucosaminidase
• CAS Number: 37326-33-3
• Numéro CE : 3.2.1.35 (BRENDA, IUBMB)
• Numéro CE : 253-464-3
• Numéro MDL: MFCD00131351
• Code UNSPSC : 12352204
• Nomenclature NACRES : NA.75

Propriétés

• Stérilité: aseptically processed
• Niveau de qualité: 200
• Type: Type IV-S
• Forme: powder
• Activité spécifique: 750-3000 units/mg solid
• Poids mol.: ~55 kDa (four subunits of 14 kDa each)
• Composition: Protein, 80-105% biuret
• Technique(s): cell culture | embryo: suitable
• Température de stockage: −20°C

Description

Application

L'hyaluronidase est une enzyme dérivée des testicules de taureau. Elle permet d'éliminer la masse du cumulus lors de l'isolement d'embryons de souris ou sur des ovocytes venant d'être libérés lors de leur préparation pour une culture in vitro.

On utilise des gonadotrophines pour induire une superovulation chez 20 souris femelles. On accouple ensuite les souris, puis on prélève et on compte les embryons de stade préimplantatoire. On traite les embryons à l'hyaluronidase jusqu'à ce que la masse du cumulus s'en dissocie. On met les embryons en culture, puis on les observe quotidiennement en consignant leur développement.

Actions biochimiques/physiologiques

Ces enzymes coupent de façon aléatoire les liaisons glycosidiques β-N-acétylhexosamine-[1→4] dans l′acide hyaluronique, la chondroïtine et les sulfates de chondroïtine.

L′hyaluronidase dégrade l′hyaluronane et elle semble être régulée de façon anormale lors de la progression du cancer.

Définition de l'unité

Une unité dégrade 0,75 μg du polysaccharide acide hyaluronique par minute à pH 5,35 et 37 ºC (valeur mesurée par absorbance turbidimétrique [λ : 600 nm] sous forme complexée avec de la BSA après 45 minutes).

Notes préparatoires

Reconstituer 1 flacon d'hyaluronidase dans 3 ml de milieu M2 (réf. M 7167 ou M 5910) ou d'eau désionisée de façon à obtenir une solution mère à 10 mg/ml. Diluer la solution mère dans du milieu M2 de façon à obtenir une concentration de travail finale d'environ 300 μg/ml.

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS08
• Mention d'avertissement: Danger
• Mentions de danger: H334
• Conseils de prudence: P261 - P284 - P501
• Classification des risques: Resp. Sens. 1
• Code de la classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 3
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable
• Équipement de protection individuelle: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)