E1014

Benzonase^® Nuklease

≥250 units/μL, ≥90% (SDS-PAGE), recombinant, expressed in E. coli, buffered aqueous glycerol solution

• Synonym(e): Endonuclease aus Serratia marcescens
• CAS Number: 9025-65-4
• EG-Nummer: 3.1.30.2 (BRENDA, IUBMB)
• MDL-Nummer: MFCD00131010
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Serratia marcescens
• Qualitätsniveau: 200
• Rekombinant: expressed in E. coli
• Assay: ≥90% (SDS-PAGE)
• Form: buffered aqueous glycerol solution
• Mol-Gew.: 30 kDa
• Konzentration: ≥250 units/μL
• Anwendung(en): research use
• Fremdaktivität: protease, essentially free
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Benzonase^®-Nuklease ist eine besonders effiziente und gentechnisch veränderte Endonuklease aus Serratia marcescens. Dieses dimere Protein mit zwei essenziellen Disulfidbindungen kann alle Formen von DNA und RNA (einzelsträngig, doppelsträngig, linear und zirkulär) unter einem breiten Spektrum von Arbeitsbedingungen angreifen und abbauen. Benzonase^®-Nuklease kann aufgrund ihrer Fähigkeit, Nukleinsäuren zu entfernen, die Reinheit und Qualität von Proteinproben verbessern.

Anwendung

Benzonase-^®Nuklease wird wie folgt verwendet: als Komponente im eiskalten Lysepuffer C zum Verdau von DNA und  RNA, um die vollständige Freisetzung aller nukleären Proteine zu erleichtern im Immunpräzipitationsschritt, um Proteinkomplexe aus Nukleoplasma und Chromatin freizusetzen als Supplement in RIPA zur Fraktionierung von SHSY5Y-Zellen für die Immunpräzipitation zur Entfernung von Nukleinsäureresten aus den Aortenwurzeln beim Dezellularisierungsverfahren

Entfernung von Nukleinsäure in Proteinproben

Biochem./physiol. Wirkung

Benzonase^®-Nuklease kann Nukleinsäuren vollständig zu Oligonukleotiden mit endständigem 5′-Monophosphat und einer Länge von 3 bis 5 Basen abbauen. Dies macht sie zu einem idealen Tool für das Entfernen von Nukleinsäuren aus rekombinanten Proteinen und für Anwendungen, die einen vollständigen Verdau von Nukleinsäuren erfordern. Neben dem Herabsetzen der Viskosität in Proteinextrakten und dem Verhindern des Verklumpens von Zellen kann die Vorbehandlung von Proteinproben mit Benzonase®-Nuklease ihre Auflösung bei der 2D-Gelelektrophorese signifikant verbessern, indem sie alle gebundenen Nukleinsäuren entfernt. Dieses vielseitige Enzym kann sowohl native als auch hitzedenaturierte DNA und RNA abbauen. Der optimale pH-Wert für seine Enzymaktivität liegt bei 8,0 bis 9,2. Benzonase^® Nuklease ist wirksam beim Entfernen von Wirts-DNA aus Mikrobiomproben. In vielen Fällen weisen Mikrobiomproben (wie Speichel oder Haut) einen hohen Anteil Wirts-DNA auf, die Downstream-Ergebnisse beeinträchtigt. Unsere Experten zeigen, dass die Verringerung der Wirts-DNA die Kosten der Sequenzierung senkt und gleichzeitig die Daten verbessert. Experimentelle Daten werden in diesem Fachbeitrag gezeigt: Benzonase^® Nuclease for Microbiome Workflows

Verdaut native oder hitzedenaturierte DNA und RNA.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Depletion der Wirts-DNA in Mikrobiom-Proben.

• Effektiver Nukleinsäureverdau in verschiedenen Arbeitsabläufen.

• Reduktion der Viskosität bei der Proteinextraktion.

Einheitendefinition

Eine Einheit verdaut mit Ultraschall behandelte Lachssperma-DNA in säurelösliche Oligonukleotide entsprechend einem ΔA₂₆₀ von 1,0 in 30 min bei einem pH-Wert von 8,0 bei 37°C (Reaktionsvolumen 2,625 ml).

Physikalische Form

Lösung in 50% Glycerin, enthält 20 mM Tris HCl, pH 8.0, 2 mM MgCl₂, and 20 mM NaCl.

Sonstige Hinweise

Gewinner des CiteAb Award 2024 in der Kategorie „Supplier Succeeding in Parkinson′s Research“ (Erfolgreiche Anbieter in der Parkinson-Forschung)

Rechtliche Hinweise

Benzonase^® Nuklease wird von der Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland und/oder ihrer Tochtergesellschaften geliefert.

Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves