C0255

Collagénase from Clostridium histolyticum

Name: Collagénase from <I>Clostridium histolyticum</I>
Brand: SIGMA

purified by chromatography, ≥500 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), lyophilized powder

Synonyme(s) :

Clostridiopeptidase A

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About This Item

CAS Number:

9001-12-1

Numéro CE :

3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)

Numéro CE :

232-582-9

Numéro MDL:

MFCD00130830

Code UNSPSC :

12352204

Nomenclature NACRES :

NA.54

Principaux documents

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Forme

lyophilized powder

Activité spécifique

≥500 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

Poids mol.

68-130 kDa

Produit purifié par

chromatography

Solubilité

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

Activité étrangère

Clostripain ≤2.0 U/mg

Température de stockage

2-8°C

Description générale

Collagenase from Clostridium histolyticum comprises of collagenases G and H. Collagenase has N-terminal activator domain and C-terminal peptidase domain. The collagen binding domains (CBD) and polycystic kidney disease-like (PKD-like) domain resides in the peptidase domain. The collagenase module undergoes structural changes upon calcium binding.

Application

Collagenase from Clostridium histolyticum has been used:

for the recovery of neutrophils from collagen gels
for the dissociation of breast tumor biopsies into single cells
for the isolation of primary human endometrial stromal cells(HESC) from endometrial biopsies

Collagenase from Clostridium histolyticum may be used for the isolation of cells from many types of animal tissue. It may be used for the disaggregation of human tumor, mouse kidney, human adult/fetal brain, lung and many other tissues. It may also be used in liver and kidney perfusion studies, for the digestion of pancreas, isolation of nonparenchymal rat liver cells and for hepatocyte preparation.

Actions biochimiques/physiologiques

La collagénase est activée à l′aide de quatre atome-grammes de calcium par mole d′enzyme. Elle est inhibée par l′acide éthylèneglycol-bis(bêta-aminoéthyléther)-N,N,N′,N′-tétraacétique, le bêta-mercaptoéthanol, le glutathion, l′acide thioglycolique et la 8-hydroxyquinoline.

Crude collagenases are mixtures of enzymes (mostly proteases) secreted by C. histolyticum. Effective release of cells from tissue requires the action of both collagenase enzymes and the neutral protease. Collagenase is activated by four gram atom calcium (Ca²⁺) per mole enzyme. The culture filtrate is thought to contain at least 7 different proteases ranging in molecular weight from 68-130 kDa.

Conditionnement

Product sold on the basis of collagen digestion units (CDU).

Définition de l'unité

Une unité de digestion de collagène (UDC) libère une quantité de peptides à partir du collagène d′un tendon d′Achille de bovin équivalant, en termes de couleur avec la méthode à la ninhydrine, à 1,0 μmole de leucine en 5 heures à pH 7,4 et à 37 °C en présence d′ions calcium. Une unité d′hydrolyse de FALGPA hydrolyse 1,0 μmole de furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala par minute à 25 °C. Une unité de protéase neutre hydrolyse la caséine et produit une couleur équivalente à 1,0 μmole de tyrosine en 5 heures à pH 7,5 et à 37 °C. Une unité de clostripaïne hydrolyse 1,0 μmole de BAEE par minute à pH 7,6 et à 25 °C en présence de DTT.