T8802

Trypsine from bovine pancreas

TPCK Treated, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥10,000 BAEE units/mg protein

• CAS Number: 9002-07-7
• Numéro CE : 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• Numéro CE : 232-650-8
• Numéro MDL: MFCD00082094
• Code UNSPSC : 12352204
• Nomenclature NACRES : NA.54

Propriétés

• Source biologique: bovine pancreas
• Niveau de qualité: 200
• Stérilité: aseptically filled
• Forme: essentially salt-free, lyophilized powder
• Activité spécifique: ≥10,000 BAEE units/mg protein
• Poids mol.: 23.8 kDa
• Composition: protein, ≥95%
• Solubilité: hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
• Activité étrangère: Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

The trypsin molecule has two domains: one is related to the enzyme active site and the tryptophan residues; the other is related to the 8-anilinonaphthalene-1-sulfonate binding.

Application

Pour la digestion de peptides par la trypsine, utiliser un rapport trypsine/peptide d′environ 1/100 à 1/20. Ce produit est généralement utilisé pour détacher les cellules adhérentes d′une surface de culture. La concentration en trypsine nécessaire pour déloger les cellules de leur substrat dépend principalement du type de cellules et de l′ancienneté de la culture. La trypsine a également été utilisée pour remettre en suspension des cellules lors d′une culture cellulaire, en recherche protéomique pour la digestion de protéines et dans diverses digestions en gel. Parmi ses autres applications, on peut citer l′évaluation de la cristallisation par des techniques à base de membrane et la détermination du fait que les vitesses et les rendements de repliement des protéines peuvent être limités par la présence de pièges cinétiques.

Trypsin can be used to release adherent cells from tissue culture plates for passaging. Trypsin has been used in a study to assess the effects of macromolecular crowding on the structural stability of human α-lactalbumin. Trypsin has also been used in a study to investigate BN-PAGE analysis of Trichoderma harzianum secretome.

Actions biochimiques/physiologiques

La trypsine clive les peptides du côté C-terminal des résidus de lysine et d′arginine. La vitesse d′hydrolyse de cette réaction diminue si l′un ou l′autre côté du site de clivage comporte un résidu acide, et l′hydrolyse est interrompue si un résidu de proline se trouve du côté carboxyle du site de clivage. L′activité trypsine est optimale à pH 7-9. La trypsine peut également cliver les liaisons ester et amide des dérivés synthétiques des acides aminés. De l′EDTA est ajouté aux solutions de trypsine pour servir d′agent chélateur, afin de neutraliser les ions calcium et magnésium qui dissimulent les liaisons peptidiques sur lesquelles la trypsine agit. L′élimination de ces ions augmente l′activité enzymatique.

Les inhibiteurs de protéase à sérine, notamment le DFP, la TLCK, l′APMSF, l′AEBSEF et l′aprotinine, inhibent la trypsine.

Définition de l'unité

Une unité de BAEE produit une A₂₅₃ de 0,001 par minute à pH 7,6 et à 25 °C lorsque le BAEE est utilisé comme substrat.

One BAEE unit will produce a ΔA₂₅₃ of 0.001 per min at pH 7.6 at 25 °C using BAEE as substrate. Reaction volume = 3.2 ml (1 cm light path).

Notes préparatoires

TPCK treated

Remarque sur l'analyse

Protein determined by E1%/280

Autres remarques

View more information on trypsin at www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS08,GHS07
• Mention d'avertissement: Danger
• Mentions de danger: H315,H319,H334,H335
• Conseils de prudence: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Classification des risques: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Organes cibles: Respiratory system
• Code de la classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Équipement de protection individuelle: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves