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Anti-digoxigénine-AP, fragments Fab

from sheep

• Synonyme(s) : anti-digoxigénine, digoxigénine
• Code UNSPSC : 12352203

Propriétés

• Source biologique: sheep
• Niveau de qualité: 100
• Conjugué: alkaline phosphatase conjugate
• Forme d'anticorps: purified immunoglobulin
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: polyclonal
• Forme: solution
• Conditionnement: pkg of 200 μL (150 U)
• Fabricant/nom de marque: Roche
• Isotype: IgG
• Température de stockage: 2-8°C

Description

Description générale

La digoxigénine est un haptène utilisé pour le marquage et la détection d′acides nucléiques. Ce produit contient des fragments Fab d′anticorps polyclonaux anti-digoxigénine, conjugués à la phosphatase alcaline. L′anti-digoxigénine-AP, fragments Fab, est utilisé pour la détection des composés marqués à la digoxigénine.

Spécificité

L′anticorps polyclonal de mouton est spécifique à la digoxigénine et à la digoxine et ne présente aucune réactivité croisée avec les autres stéroïdes, notamment les œstrogènes et androgènes.
Inactivation à la chaleur : oui

Application

Utiliser l′anti-digoxigénine-AP, fragments Fab, pour la détection des composés marqués à la digoxigénine dans les applications suivantes :

• Puces à ADNc
• Hybridation sur colonies/plaques
• Dot blots
• ELISA
• Essai de décalage de gel
• Immunohistochimie
• Hybridation in situ
• Blot de séquençage de l′ADN non radioactif
• Northern blots
• Essais de protection à la RNase
• Southern blots
• Western blots
• Hybridation in situ en fluorescence
• Hybridation in situ sur coupes et Hybridation in situ sur préparations complètes
• Essai de décalage de mobilité électrophorétique

Notes préparatoires

Après immunisation avec la digoxigénine, l′IgG de mouton a été purifiée par chromatographie d′échange d′ions, et l′IgG spécifique a été isolée par immunosorption. Les fragments Fab obtenus par digestion à la papaïne ont été purifiés par exclusion stérique, conjugués au marqueur spécifique et stabilisés dans du tampon.
Concentration de travail : La concentration de travail du conjugué dépend de l′application et du substrat. Les concentrations suivantes peuvent servir de guide :

• Dot blots : 150 mU/ml
• ELISA : 150 à 300 mU/ml
• Immunohistochimie/immunocytochimie : 250 à 500 mU/ml
• Hybridation in situ : 1,5 à 7,5 U/ml
• Southern blots : 150 mU/ml
• Western blots : 250 à 500 mU/ml

Solution de travail : Northern blots, Southern blots
100 mM acide maléique, 150 mM NaCl, pH 7,5.
Western blots
50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 7,5
Autres applications
100 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 7,5

Pour réduire la liaison non spécifique : 1 % de réactif de blocage (p/v) ou 1 à 5 % de sérum de veau fœtal inactivé à la chaleur (v/v) ou de sérum de mouton normal.
Conditions de stockage (solution de travail) : Le conjugué dilué est stable entre 2 et 8 °C pendant 12 heures.
Il est impératif de le préparer fraîchement juste avant l′emploi.

Remarque sur l'analyse

• Réactivité croisée avec la digitoxine et la digitoxigénine : <1 %
• Aucune réactivité croisée avec les stéroïdes humains œstrogéniques et androgéniques, p. ex. œstradiol ou testostérone
• Réactivité croisée avec la digoxine : inconnu
• Le conjugué ne se lie pas du tout à lui-même
• Normalement, une molécule de conjugué se lie à une molécule de digoxigénine, bien qu′il existe deux sites de liaison possibles pour la digoxigénine
• Une liaison non spécifique à l′ARN n′est pas anticipée

Autres remarques

Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Informations sur la sécurité

• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Point d'éclair (°F): No data available
• Point d'éclair (°C): No data available