C2905

Chondroïtinase ABC from Proteus vulgaris

lyophilized powder, 0.3-3 units/mg solid

• Synonyme(s) : Chondroïtine ABC lyase
• CAS Number: 9024-13-9
• Numéro CE : 4.2.2.4 (BRENDA, IUBMB)
• Numéro CE : 232-777-9
• Numéro MDL: MFCD00130795
• Code UNSPSC : 12352204
• Nomenclature NACRES : NA.54

Propriétés

• Source biologique: bacterial (Proteus vulgaris)
• Niveau de qualité: 300
• Conjugué: (Glucosaminoglycan)
• Forme: lyophilized powder
• Activité spécifique: 0.3-3 units/mg solid
• Poids mol.: ~120 kDa by gel filtration
• Composition: Protein, ~35% biuret
• Application(s): diagnostic assay manufacturing
• Température de stockage: −20°C

Description

Application

La chondroïtinase ABC proposée par Sigma a été utilisée pour digérer des glycosaminoglycanes de type sulfate de chondroïtine (CSGAG) à liaison O. Cette enzyme a également été utilisée pour digérer les chaînes glycosaminoglycanes des protéoglycanes lors de la conception et de l′expression d′un gène de versicane recombinant dans des systèmes de mammifère. Elle a également été employée pour digérer le sulfate de chondroïtine dans les complexes de protéoglycanes Cette enzyme a aussi été utilisée pour éliminer les chaînes de glycane de l′aggrécane, supprimant ainsi son effet inhibiteur sur la croissance de l′axone.

Actions biochimiques/physiologiques

La chondroïtinase ABC catalyse la dégradation par élimination des polysaccharides contenant des liaisons (1-4)-β-D-hexosaminyle et (1-3)-β-D-glucuronosyle (ou (1-3)-α-L-iduronosyle) en disaccharides contenant des groupes 4-déoxy-β-D-gluc-4-enuronosyle. Elle agit sur le 4-sulfate de chondroïtine, le 6-sulfate de chondroïtine et le sulfate de dermatane. Cependant, elle n′agit que lentement sur l′hyaluronate. Son poids moléculaire est d′environ 120 kDa et elle est formée de 2 sous-unités non identiques d′un poids moléculaire de 86 kDa et de 32 kDa. Son pH optimal est de 8,0 pour le sulfate de chondroïtine et 6,8 pour l′acide hyaluronique. Sa température optimale est de 37 °C. Le Zn²⁺ à 1 mM agit comme inhibiteur de cette enzyme, tandis que l′acétate à 0,05 M est un activateur.

Conditionnement

Conditionné en fonction de l′activité de la chondroïtinase C.

Définition de l'unité

Une unité libère 1,0 μmole d′un mélange de 2-acétamido-2-désoxy-3-O-(acide β-D-gluc-4-ène-pyranosyluronique)-4-O-sulfo-D-galactose et 1,0 μmole de 2-acétamido-2-désoxy-3-O-(acide β-D-gluc-4-ène-pyranosyluronique)-6-O-sulfo-D-galactose à partir de sulfate de chondroïtine dérivée de cartilage de requin, par min à pH 8,0 et 37 °C.

Forme physique

Poudre lyophilisée contenant des sels de tampon Tris.

Notes préparatoires

Reconstituer dans une solution aqueuse comportant de l′albumine de sérum bovin (ABS) à 0,01 %. Des dilutions supplémentaires peuvent être réalisées dans un tampon contenant 50 M de Tris, pH 8,0, avec 60 mM d′acétate de sodium et 0,02 % d′albumine de sérum bovin. Les solutions doivent être fraîchement préparées.

Autres remarques

Pour en savoir plus sur les enzymes pour l′analyse des glucides complexes, rendez-vous sur www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 3
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable
• Équipement de protection individuelle: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)